丹皮酚的测定—高效液相色谱法

应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定桂枝茯苓丸中丹皮酚的含量。

本方法适用于中成药桂枝茯苓丸。

方法原理： 供试品于容量瓶中，加甲醇超声提取，放冷，摇匀，得供试品溶液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长274nm处检测丹皮酚的吸收值，计算出其含量。

试剂： 甲醇（色谱纯）

仪器设备： 1仪器

1.1高效液相色谱仪

1.2色谱柱

YGW-C18(4.6mm×250mm,10μm)

1.3紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 水 = 60 40

2.2检测波长：274nm

2.3柱温：35℃

2.4流速：0.8mL/min

试样制备： 1.称取供试品

取桂枝茯苓丸（研细）0.3g，精密称定。

2.对照品溶液的制备

精密称取一定量的丹皮酚对照品，用重蒸水分别制成25.04、50.08、75.12、100.16、150.24、250.4μg/mL对照品溶液。

3.供试品溶液的制备

将供试品置50mL容量瓶中，加适量甲醇超声处理1小时，放冷至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤： 1.标准曲线绘制

将上述系列标准浓度的对照品溶液，各进样10μL，以峰面积积分值对浓度进行回归，绘制标准曲线。

2.供试品溶液的测定

分别精密吸取上述对照品溶液50.08μg/mL与供试品溶液各10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长274nm处测定丹皮酚的峰面积积分值，用外标法计算出丹皮酚的含量。 [2]  

丹皮酚具有、、和抑制变态反应的作用。对压尾、醋酸等物理或化学因素所致的，具。对由角叉菜胶、蛋清、甲醛、组胺、5－羟色胺、缓激肽、二甲苯及内毒素等所致的反应，具。对伤寒菌苗、三联疫苗等引起的体温升高，具。对II、III、IV型变态反应均具有。

具有、、抗菌、、抗氧化 、等作用，在日化方面，丹皮酚能抑制细胞内O2-自由基产生，能使，将皮肤中沉积色素，；同时也具有、、、等作用。对色斑、、、、带状疮疹、具有较好的和保健效果，此外，在牙膏、含漱液、牙粉、水中有较好的作用。

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